S/MAR Elemente
S/MAR Elemente, so genannte Scaffold/Matrix Attachment Regions (S/MARs), sind Ankersequenzen, mit denen unabhängig regulierbare Chromatindomänen mit dem Proteinskelett des Zellkerns verbunden werden. Neben der Unterstützung der Transkription und dem Schutz (fremder) genetischer Information vor Inaktivierung hat besonders eine Eigenschaft dieser S/MAR-Elemente eine besondere Bedeutung bei der Herstellung hoch effizienter Plasmid-DNA erlangt:
Plasmide, die neben dem (z.B. therapeutisch) wirksamen Gen ein an einer definierten Stelle eingefügtes S/MAR-Element enthalten, werden episomal repliziert und als eigenständige Einheiten an die Tochterzellen der eukaryontischen Zielzelle weitergegeben. Das heißt, das Plasmid bleibt auch in Abwesenheit von Selektionsdruck über viele Generationen als Episom erhalten und wird als autonome genetische Einheit – ohne zu integrieren – stabil exprimiert. Mittlerweile ist es gelungen, die Ankersequenz auf ein minimales Motiv von ca. 700 Basenpaaren zu reduzieren, ohne eine signifikante Reduzierung bzgl. der stabilen Weitergabe an die Tochterzellen zu verzeichnen.
Entsprechende Plasmide und Minicircle mit S/MAR Elementen zur stabilen Genexpression sind beispielsweise als pEPI- bzw. pEpito-Familien bekannt und werden auf Basis entsprechender Lizenzvereinbarungen von PlasmidFactory vertrieben.